悬浮细胞和贴壁细胞复苏操作大不同细节决定细胞存活率
贴壁细胞复苏核心流程
1、快速解冻:冻存管37度水浴1分钟内wan全融化,避免DMSO损伤细胞
2、离心清洗:转移至含培养基的离心管,1000rpm离心5分钟,弃上清去除冻存液
3、重悬贴壁:用预热培养基重悬,接种至培养瓶,摇匀后静置培养,24小时后观察贴壁情况
悬浮细胞复苏更灵活
1、直接复苏法:解冻后可直接将细胞悬液加入新鲜培养基,无需离心(敏感细胞建议使用离心法,避免DMSO对细胞的损伤
2、离心法:若需换液,低速离心(300-800rpm)后重悬,避免机械损伤
贴壁VS悬浮复苏差异
贴壁细胞:必需离心去除冻存液,依赖贴壁生长,复苏后恢复期长
悬浮细胞:可免离心直接培养,恢复快但需维持密度,避免频繁观察(敏感细胞仍建议使用离心法,避免DMSO对细胞的损伤)
无论哪种细胸,快速解冻、无菌操作和培养基预热都是关键

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