A-498（ATCCHTB-44）源于52岁女性肾透明细胞癌患者，由AaronsonS建立，属上皮样贴壁细胞，倍增时间约33至60小时。以下为标准化操作规范。
培养体系。培养基采用MEM（含NEAA）或DMEM，加10%优级胎牛血清及1%青霉素-链霉素双抗。培养环境严格控制在37℃、5%CO₂、饱和湿度条件下。密集培养时胞内可见巨大空泡，属正常特性，无需干预。
传代操作。细胞密度达80%至90%时启动传代，推荐比例1:2至1:4，传代建议1:2。弃旧液后以不含钙镁的PBS润洗一至两次，加0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液1毫升，37℃消化1至2分钟，镜下见细胞变圆、间隙增大即终止，轻拍瓶壁后加含血清培养基中止消化。1000RPM离心4分钟，弃上清，新鲜培养基重悬后均匀分瓶，补足培养基后静置培养。消化时间需严格把控，过度消化将直接损伤细胞活性。
换液与冻存。每周换液2至3次。冻存采用梯度降温法：冻存液配方为90%培养基加10%DMSO，或55%基础培养基加40%FBS加5%DMSO，细胞浓度不低于1×10⁶/mL。经程序降温盒-80℃过夜后转入液氮长期保存，转入后务必复苏一管验证活性。
污染防控。支原体、细菌、真菌检测均为阴性方可使用。全程严格无菌操作，定期检测支原体，必要时以双抗预防细菌污染。
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