慢病毒载体应用

慢病毒载体应用

1 体外感染细胞

慢病毒载体能够有效地感染培养的肿瘤细胞、肝细胞、心肌细胞、神经元、内皮细胞、干细胞等多种类型原代细胞和大部分细胞系。慢病毒的感染具有整合特性，能够将外源基因有效地整合到宿主染色体上，因而可以达到持久性表达，从而构建稳定细胞株，用于基因的细胞功能研究。

体外使用慢病毒感染细胞需要注意，由于每种细胞对慢病毒的敏感性不同，有的容易感染，有的比较难，同时每种慢病毒载体荧光强度也有差异，所以正式实验前需要做病毒感染预实验来确认MOI值以达到理想的实验效果。

MOI值是multiplicity of infection 的缩写，即感染复数，其含义是感染时病毒与细胞的数量比值，一般以实验中某个细胞，感染达到80%，定义为这个细胞的MOI值，即病毒量与细胞数的比值；加的病毒量(μl)=细胞数×MOI/滴度(…/ml) ×1000

注意：理论上MOI值越高，慢病毒感染上的可能性越大，感染效率越高，但是这样对细胞的毒性也越大，因此，预实验确认MOI值要在细胞成活率和感染效率中找到一个平衡点。一般如果MOI超过100，甚至200还感染不是，说明慢病毒非常难感染这株细胞，甚至感染不上，考虑换一种方式，如腺病毒或电转。

2 体内构建成瘤模型

体内应用时，慢病毒可以携带目的基因或萤光素酶基因，筛选稳定表达的肿瘤细胞株，直接接种构建皮下成瘤模型，或通过原位或静脉注射等方式构建转移模型，活体成像检测用于研究体内肿瘤的发生发展或转移等。

慢病毒载体基础知识及应用

此外，也可以体内定位注射慢病毒，或瘤内注射慢病毒等。