一、构建方法载体设计与构建PVRIG过表达载体：选择慢病毒或逆转录病毒载体（如pCDH、pLenti等），将PVRIG基因的全长CDS序列克隆至多克隆位点，并引入强启动子（如CMV或EF1α）。NFAT-Luc2报告系统：在Jurkat细胞...

细胞稳定转染是指将外源基因整合到宿主细胞的基因组中，使其能够长期稳定表达并传递给后代细胞。这一过程通常需要高效的DNA递送方法、筛选标记以及后续的筛选和克隆步骤。以下是细胞稳定转染的详细流程和注意事项：转染前的准备细胞培养：选择适合的细胞系...

作用在肝移植排斥反应中，ATCC人肝星状细胞（人肝星状细胞的一种）通过多种机制参与。其处于激活状态时，会分泌多种细胞因子和细胞外基质成分。一方面，可促使Th2/Th3型细胞因子分泌增加，如Th2型细胞因子IL-10和Th3型细胞因子TGF-...

293细胞（HEK293细胞）是一种广泛应用于分子生物学、基因工程和病毒载体研究的人胚肾细胞系。其培养方法主要包括以下几个步骤：细胞复苏将冻存管中的293细胞在37℃水浴中解冻，轻轻摇动使其全融化。将解冻后的细胞悬液加入预热的培养基中，轻轻...

细胞贴壁不牢一、常见原因分析消化过度胰酶作用过久/浓度过高：破坏膜表面粘附蛋白，导致无法重新附着。吹打力度过大：机械损伤使胞外基质脱落。环境因素pH异常（如NaHCO₃分解致pH过碱）：影响整合素介导的粘附。血清/基质不足：缺乏纤维连接蛋白...

过度劳累和不良生活习惯会从多个层面干扰细胞的能量代谢过程（尤其是线粒体功能），具体机制如下：1.线粒体超负荷与氧化损伤过度劳累会使线粒体持续高速运转以产生更多ATP（能量分子），但这一过程会伴随大量自由基（如活性氧ROS）的生成。自由基会攻...

1.应激反应加剧甚至死亡原因若解冻后的直接暴露于不稳定环境（如未预热的培养基或温度波动的CO₂），会导致渗透压骤变或pH失衡表现细胞内冰晶复融损伤加剧；DMSO残留毒性未被稀释；部分敏感型（如RAW264）可能因营养竞争加速老化2.贴壁失败...

细胞冻存本身没有问题，但复苏后出现问题的原因可能涉及多个方面，包括操作细节、细胞状态、冻存液质量以及复苏后的培养环境等。以下从不同角度详细分析可能的原因，并提出相应的解决方法：冻存操作不当未严格遵循程序降温：直接将细胞放入液氮中或未使用程序...

在生命科学领域，细胞模型是探索疾病机制、开发新药和验证生物技术的重要工具。而ATCC（美国典型培养物保藏中心）作为影响力的生物资源库之一，其提供的细胞系如同一个庞大的"活体图书馆"，为科研工作者提供了标准化的研究材料。一、ATCC：细胞资源...